1990年9月，闫妮入伍成为一名文艺兵。同年11月，被部队送到解放军艺术学院表演系学习。1993年11月，闫妮经人介绍，，到上海和东方卫视主持人吉雪萍一起给日本NHK电视台录制了一档中日文的旅游电视片。1994年4月，回来后和“兰州班”同学排演了话剧《第12夜》，闫妮扮演主角玛利亚。1994年底，闫妮加入空军政治部电视艺术中心，参演的第一个话剧是《湘江，湘江》，但戏份极少，之后参加的一些话剧也大多是跑龙套。1999年正式进入演艺生涯。

从《武林外传》到《三枪拍案惊奇》，再到如今的《一仆二主》，闫妮演艺事业上颇具代表性的作品几乎都偏喜剧，如果有人评价闫妮是一个成功的喜剧演员，那对她自己来说就是“至高无上”的评价。幽默是一种很好的人生态度，她希望用一种喜剧的表达方式去演绎，给别人带来积极的能量。

电影《传奇网页版开服》中闫妮扮演骆冰。2005年因主演《武林外传》中的“佟湘玉”让她一炮走红，被人们所熟知。闫妮，是家中的小女儿，出生在工人家庭。1986年因为闫妮家从城西搬到了城南西安电影制片厂附近，闫妮就读的西安第45中学有很多学生都是西安电影制片厂的子弟，所以大家对于大学报考艺术学院的气氛十分浓厚。